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        大腸桿菌浸染毒性噬菌體的鑒定

        日期:2021-02-22 作者:發酵罐專業生產廠家上海聯環公司 閱讀:18

        1.配制培養基:
        LB液體培養基(1000ml水,10g蛋白胨:5g酵母粉:5g氯化鈉)、1.5%的固體培養基、0.7%的半固體培養基;
        2. 倒平板:將1.5%的固體培養基溶化,每個平板倒10-15ml的1.5%固體培養基,然后靜置至平板上沒有水珠為宜;
        3. 分裝0.7%的半固體培養基:將0.7%的半固體培養基加熱溶化,然后用5ml的移液槍向每個試管加入5ml的半固體培養基;試管的數量和上一步平板數是相同的;
        4. 等到試管中培養基溫度降至40℃左右時(不燙手),迅速向試管中加入100ul敏感菌和100ul的待測噬菌體液,搖勻;
        5. 將搖勻好的該培養基迅速倒入之前已倒有1.5%固體培養基平板中,晃動平板,使其鋪滿平板,靜置;
        6. 待所有平板倒好后,將其放入30℃恒溫箱中培養12h左右,即可觀察有無噬菌斑。
        8.2減少或避免噬菌體浸染的防范措施
        1. 從菌種構建開始,克隆菌種的感受態細胞及其它試劑要保證純凈沒有被污染;
        2. 發酵系統中的空氣系統要定期消毒并檢查;
        3. 發酵種子活化的環境要保持潔凈,并定期消毒;
        4. 發酵罐接種時要無菌操作,發酵過程取樣后的廢液要進行收集滅菌處理;
        5. 發酵過程的尾氣要通入吸收液處理后再排掉;
        6. 定期檢修發酵罐避免消毒死角的存在,發酵系統中的補料設施也要進行檢查;
        7. 發酵場所的地溝,排水池等要保持清潔,保證無活菌排放,并定期消毒;

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        發酵罐
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